O Fenômeno da Fluorescência
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O Fenômeno da Fluorescência
O Fenômeno da Fluorescência
Fluorescência é um fenômeno molecular no qual uma substância irradia energia de luz quase que instantaneamente ao ser atingida por luz de outra fonte. Alguma energia desta luz incidente é absorvida por essa substância, o que significa que a luz irradiada é tipicamente de menor energia (e, portanto, maior comprimento de onda) do que a da fonte. O processo de absorção de luz e radiação é conhecido como excitação e emissão. A fluorescência é exibida pela maioria das substâncias orgânicas e não orgânicas e nos primeiros dias da microscopia de fluorescência (na virada do século) os microscopistas observaram essa fluorescência primária natural, chamada autofluorescência.
A utilização da fluorescência como uma modalidade de imagem tornou-se uma ferramenta inestimável para os pesquisadores, particularmente aqueles nos campos da ciência biológica e material, estudando substâncias que antes eram "invisíveis" sob outras formas de microscopia. Os biólogos podem, como mencionado acima, corar componentes subcelulares muito específicos com moléculas fluorescentes, permitindo-lhes realçar sua localização na célula e estudar interações moleculares potenciais em resoluções muito altas. A imagem na figura 3, por exemplo, foi feita utilizando filtros ópticos para visualizar a conjugação de três diferentes fluorocromos a três diferentes alvos celulares. Nesta imagem, MitoTracker Red, Alexa Fluor 488 e DAPI são conjugados às mitocôndrias, filamentos de actina e núcleos da célula, respectivamente.
Figura 2: Imagem TIRF de três cores de uma célula de fibroblastos de rim de macaco verde normal africano (CV-1). Imagem cortesia de Michael W. Davidson, do Laboratório Nacional de Campo de Alta Magnética, da Universidade Estadual da Flórida
A utilização da fluorescência como uma modalidade de imagem tornou-se uma ferramenta inestimável para os pesquisadores, particularmente aqueles nos campos da ciência biológica e material, estudando substâncias que antes eram "invisíveis" sob outras formas de microscopia. Os biólogos podem, como mencionado acima, corar componentes subcelulares muito específicos com moléculas fluorescentes, permitindo-lhes realçar sua localização na célula e estudar interações moleculares potenciais em resoluções muito altas. A imagem na figura 3, por exemplo, foi feita utilizando filtros ópticos para visualizar a conjugação de três diferentes fluorocromos a três diferentes alvos celulares. Nesta imagem, MitoTracker Red, Alexa Fluor 488 e DAPI são conjugados às mitocôndrias, filamentos de actina e núcleos da célula, respectivamente.
Figura 2: Imagem TIRF de três cores de uma célula de fibroblastos de rim de macaco verde normal africano (CV-1). Imagem cortesia de Michael W. Davidson, do Laboratório Nacional de Campo de Alta Magnética, da Universidade Estadual da Flórida
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