Dicas práticas para aumentar o poder de resolução

As lamínulas têm a espessura correta? É de fundamental importância que as lamínulas correspondentes a objetivas de alta abertura (maior que 0,65) tenham a espessura padrão de 170 micrômetros devido ao fato de que a espessura da lamínula é levada em consideração quando as objetivas são projetadas. Portanto, se uma lamínula de espessura diferente (menos de 165 ou mais de 175 micrômetros) for usada, a qualidade da imagem óptica sofre visivelmente. Em geral, a regra geral para objetivas com abertura numérica de 0,7 ou superior é que elas podem tolerar uma variação de 10 micrômetros, enquanto objetivas de abertura numérica mais baixas (0,3 a 0,7) podem tolerar um nível mais alto de desvio, geralmente até 30 micrômetros. micrômetros.

Você está usando o óleo de imersão correto? Todas as objetivas com abertura numérica maior que 0,95 são projetadas para uso com meios de imersão (geralmente óleo de índice de refração 1,515). O óleo de imersão é livre de bifenilos policlorados e quase não apresenta autofluorescência. A imagem ficará marcadamente prejudicada se bolhas de ar forem introduzidas na camada de imersão, portanto o óleo deve ser aplicado com cuidado para evitar bolhas. As bolhas de ar podem ser facilmente visualizadas removendo a ocular e examinando o plano focal traseiro da objetiva através dos tubos de observação do microscópio (ou usando uma lente Bertrand). Se forem observadas bolhas de ar, a objetiva e a lâmina da amostra devem ser limpas e o óleo cuidadosamente reaplicado.